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Waters液相色譜柱使用緩沖鹽操作方法了解下
更新時(shí)間：2020-04-27 點(diǎn)擊次數(shù)：2762次
Waters液相色譜柱的使用壽命，除了與所分析的樣品和流動(dòng)相及使用頻率有關(guān)系外，主要的是與日常的維護(hù)密切相關(guān)。為延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命，維護(hù)您的利益，請(qǐng)仔細(xì)閱讀此部分。
色譜柱的使用壽命主要是分為柱效和柱壓兩個(gè)指標(biāo)來(lái)衡量，如果一支色譜柱柱效太低或柱壓太高，通常被認(rèn)為該色譜柱已經(jīng)結(jié)束。因此，延長(zhǎng)色譜柱使用壽命的關(guān)鍵是，消除引起柱效下降和柱壓升高的因素。
Waters液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器。所以在選擇色譜柱之前，多了解一下自己的樣品和雜質(zhì)，它們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量等。
1、樣品是極性和弱酸性的；C18可選擇在100%酸性水溶液條件下進(jìn)行檢測(cè)，即選擇一種能承載100%純水并能很好保留極性化合物的色譜柱。
2、如果樣品的極性太強(qiáng)或酸度太強(qiáng)；可以選擇CN、NH2或硅膠柱、HILIC(親水色譜)，也可以使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng)，需要相對(duì)精確的流動(dòng)相ph值，否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)，另外離子對(duì)試劑很難洗掉，基本上離子對(duì)色譜柱不能用于其他實(shí)驗(yàn))
正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話：使用前要過(guò)濾，使用后要沖洗。具體方法如下：
1、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需用過(guò)渡流動(dòng)相以1。0ml/min流速?zèng)_洗60min；使用后去除緩沖鹽的另一個(gè)方法是用過(guò)渡流動(dòng)相以0。2ml/min流速?zèng)_洗色譜柱過(guò)夜。
2、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前，用與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)渡流動(dòng)相以1。0ml/min流速?zèng)_洗60min，再用該過(guò)渡流動(dòng)相以1。0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩，以避免梯度過(guò)程中緩沖鹽析出。
